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牛奶體細(xì)胞概念的提出
乳汁中細(xì)胞計(jì)數(shù)或者說(shuō)是白細(xì)胞計(jì)數(shù)在奶牛乳房炎監(jiān)測(cè)中已運(yùn)用的大概有百多年的歷史。體細(xì)胞這一概念是在 1910 年由 Prescott 和 Breed首先提出,當(dāng)時(shí)他們建議用“Body cells”,因?yàn)楫?dāng)時(shí)認(rèn)為奶中細(xì)胞是從上皮細(xì)胞脫落下來(lái)的。直到1960 年左右,“Somatic cells”已逐漸被人們所普遍接受。
牛奶體細(xì)胞的組成
現(xiàn)今我們通常所說(shuō)的牛奶體細(xì)胞主要指白細(xì)胞,包括巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及多形核白細(xì)胞(PMN)。乳中細(xì)胞類型研究表明,腺泡上皮細(xì)胞,無(wú)論是在干奶期還是泌乳期,在乳中很少,僅占細(xì)胞總數(shù)的7%以下。
所以說(shuō)泌乳期乳中細(xì)胞數(shù)的增加不是由于上皮細(xì)胞的脫落造成的。巨噬細(xì)胞是正常乳中的主要細(xì)胞,占細(xì)胞總數(shù)的 30%~70%。
牛奶體細(xì)胞出現(xiàn)的原因
牛奶體細(xì)胞主要是白細(xì)胞對(duì)乳腺有重要的作用,它對(duì)病原微生物的入侵起監(jiān)視和殺滅作用。巨噬細(xì)胞及PMN具有吞噬功能,可以殺死入侵病原微生物,乳中淋巴細(xì)胞包括T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞,它們?cè)趯?duì)入侵微生物的特異性免疫中起很重要的作用,病原微生物一旦通過(guò)乳頭管進(jìn)入乳腺并在其中增殖,就會(huì)引起一系列的炎性反應(yīng)。此時(shí)乳中的細(xì)胞就同病原微生物相互斗爭(zhēng),并且產(chǎn)生一系列的炎性因子,而這些炎性因子將導(dǎo)致一系列的病理變化,這些炎性因子包括補(bǔ)體,前列腺素,白三烯、組胺、5-HT(5-羥色胺)、白介素,TNF(腫瘤壞死因子)、白細(xì)胞殺菌素以及一些其他細(xì)胞因子,典型的癥狀包括血管通透性增加,血管擴(kuò)張,血流量增加,水腫,中性粒細(xì)胞轉(zhuǎn)移,以及乳腺合成能力降低,并伴有疼痛,發(fā)熱。在炎癥初期乳腺主要的防御機(jī)制就是 PMN 的遷入,正常情況下,PMN 可自由通過(guò)毛細(xì)血管,而不黏附或很少黏附在血管壁上,一旦出現(xiàn)炎癥,黏附分子被大量表達(dá),從而使得 PMN 黏附、遷移并通過(guò)細(xì)胞間隙而進(jìn)入乳腺。乳中白細(xì)胞和被損傷的組織釋放一些因子能吸引 PMN 大量涌入乳中,在炎癥初期乳中細(xì)胞 90%以上的是 PMN,有報(bào)導(dǎo)表明大量要進(jìn)入乳腺的 PMN 在腺泡外聚集,甚至在某些腺泡受損較嚴(yán)重的地方,PMN 可通過(guò)上皮間隙而進(jìn)入腺泡,因此 PMN 在感染區(qū)的大量遷移是造成牛奶體細(xì)胞SCC 大量上升的主要原因,因而有人認(rèn)為,PMN 遷入的速率是消除感染乃至決定病情的關(guān)鍵因素。
另外,據(jù)報(bào)道 PMN 也可在乳頭導(dǎo)管、乳頭池、乳腺池等處透過(guò)基底膜而進(jìn)入乳汁。因此,這些地方被認(rèn)為是炎癥初期機(jī)體作出反應(yīng)并允許 PMN 通過(guò)的地方,乳腺以此來(lái)抵御微生物的入侵,值得注意的是,在慢性炎癥反應(yīng)過(guò)程中,單核細(xì)胞也可透入。因此,SCC 增加也是白細(xì)胞遷入造成的。乳中 PMN執(zhí)行吞噬入侵微生物的功能,但是它也可以吞噬諸如脂滴、酪蛋白這樣一些物質(zhì),而這些物質(zhì)被吞入后 PMN 吞噬微生物的功能將降低。即便如此,PMN 仍是乳腺中起關(guān)鍵作用的因素,當(dāng)然它也可以釋放一些物質(zhì)以增加血管通透性和吸引更多的白細(xì)胞到炎性部位。在一些頑固性感染病例中,雖然 PMN 數(shù)量會(huì)有所波動(dòng),但總體上是處在一個(gè)高水平上,而且即便是將感染的病原微生物清除后,它仍會(huì)維持在高水平上直至乳腺修復(fù)。還有報(bào)道說(shuō):微生物被清除后 PMN 在高水平上仍要維持幾天、幾周甚至更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
影響牛奶體細(xì)胞的因素
據(jù)報(bào)道,牛奶體細(xì)胞變化受到很多因素的影響,如年齡、乳期、晝夜、擠奶過(guò)程,感染等。近年來(lái)報(bào)道漸趨于一致即認(rèn)為,感染是引起變化的主要因素。
1 )微生物感染的影響
有研究表明,體細(xì)胞SCC的主要影響因素就是微生物感染,這不論是在乳區(qū)水平、個(gè)體還是桶奶水平上都是如此。有人對(duì)感染后的奶牛同其 BTSCC(桶奶 SCC)聯(lián)系加以分析后認(rèn)為,BTSCC 之所以發(fā)生變化,感染是主要影響因素。感染乳腺的微生物被劃分為二大類,即重要微生物及次要微生物,重要微生物一旦感染將使SCC大幅增加,這類微生物包括金黃色葡萄球菌,無(wú)乳鏈球菌及其他一些鏈球菌,大腸桿菌等;次要微生物包括牛棒狀桿菌以及凝固酶陰性的一些葡萄球菌,它們感染后,通常使得感染乳區(qū)化正常乳區(qū)的 SCC 高出 2~3 倍。現(xiàn)今,許多研究表明,僅用SCC一項(xiàng)來(lái)作為衡量乳區(qū)感染與否是不可信的,因?yàn)槌3霈F(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性的情況。造成這種誤差的部分原因可能是感染期間 SCC 的正常波動(dòng)所致;這種變化在人為用各種病原微生物感染乳腺的實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)。即在感染的早期階段數(shù)量急劇上升,可以在幾小時(shí)或幾天內(nèi)達(dá)到峰值,(這與感染微生物種類有關(guān))隨后由于中性粒細(xì)胞的吞噬而適度下降。而 SCC變化范圍依感染微生物及轉(zhuǎn)歸結(jié)果以及牛個(gè)體差別而變化很大。有研究表明被感染乳區(qū) SCC 是呈波動(dòng)態(tài)勢(shì),在慢性感染乳區(qū),微生物數(shù)量及SCC二者均隨時(shí)間而上下波動(dòng),同時(shí)未感染乳區(qū)SCC也在變化,但始終處在 200,000/mL 以下。另外主要微生物感染后,SCC的變動(dòng)幅度也由于牛個(gè)體不同而不同,所以僅憑 SCC 一項(xiàng)來(lái)判別乳區(qū)感染與否及微生物種類并不十分可靠。
2 )年齡、乳期對(duì)SCC的影響
研究者普遍認(rèn)為,牛奶體細(xì)胞SCC 隨胎次增加及乳期向后延伸而增加,但 Harmon研究卻不同,他將牛群中分成感染牛與未感染牛,結(jié)果顯示:在未感染牛群中,牛奶體細(xì)胞 變化都很小,無(wú)論是年齡還是泌乳期影響都很小, Sheldrak等人也證實(shí)無(wú)論是胎次數(shù)目增加,還是不同乳期階段,它對(duì)未感染牛群的 SCC影響都很小,有研究顯示,在同一乳期中,從分娩35天到205天截止,SCC數(shù)目從35天的83,000/mL 逐漸升到285天的160,000/mL,但是相同的時(shí)間內(nèi)金黃色葡萄球感染的乳區(qū)中,SCC的數(shù)量卻從234,000/mL升至1,000,000/mL。當(dāng)然,在娩后所有乳區(qū)SCC均有增加,但那些未感染的乳區(qū)和感染了次要微生物的乳區(qū)是SCC分娩后35天均很快的下降。Harmon研究也表明,在微生物未感染的牛群中,SCC受胎次、泌乳乳期的影響不大。
3 )應(yīng)激對(duì)SCC的影響
Wells等報(bào)道,各種應(yīng)激因素都能引起SCC上升。但據(jù) Paape 等人報(bào)道,無(wú)論將牛只放入可以控制環(huán)境條件中的隔離室內(nèi),還是給牛注射 ACTH 或者是皮質(zhì)醇類激素,未感染的牛只其SCC只有很小改變或者說(shuō)是沒有改變。Elvinger調(diào)查表明,經(jīng)受熱應(yīng)激的牛只SCC有大量的上升,他們通過(guò)將牛圈在可以控溫的房間內(nèi)或予其他的熱刺激,未感染牛與感染金黃色葡萄球的牛的SCC分別是145,000/mL和105,000/mL,分析認(rèn)為造成這種差異的部分原因可能是由于熱應(yīng)激造成的產(chǎn)奶量下將所致,因熱應(yīng)激造成產(chǎn)奶量下降10%~20%也是很常見的。將牛單獨(dú)圈起這種應(yīng)激會(huì)不會(huì)造成SCC上升,LefcourtA M研究表明這一應(yīng)激雖可使牛的行為有所變化,但對(duì)SCC影響甚微。在法國(guó)科學(xué)家們進(jìn)行了一項(xiàng)非常有趣的試驗(yàn),他們將牛組成二組,一組圈起來(lái),另一組在每天早晨擠奶后走上9.6 km,結(jié)果顯示:走路的一組中受感染的牛其SCC達(dá)185,000/mL,而未感染的牛SCC為47,000/mL,這二者SCC都多于另一組牛的SCC。同時(shí)顯示運(yùn)動(dòng)不僅會(huì)使奶牛奶量下降,而且使飼料的攝入量也減少,研究者將已感染和由于劇烈運(yùn)動(dòng)損傷乳房而造成感染的牛聯(lián)系起來(lái)分析,認(rèn)為SCC變動(dòng)與感染的關(guān)系很大,表明各種各樣的應(yīng)激對(duì)受微生物感染牛的SCC影響較未感染牛的大。
4 )季節(jié)的影響
據(jù)報(bào)道,夏季 SCC 較冬季高,這與夏季臨床型乳房炎多是發(fā)是吻合的。研究表明,夏季乳腺對(duì)環(huán)境中病原微生物易感與牛群中存在大量的大腸桿菌是相一致的。同時(shí)也表明了熱應(yīng)激不僅可增加乳腺的易感性而且使得環(huán)境中病原微生物的數(shù)量也大大增加,熱應(yīng)激本身不能單獨(dú)使SCC上升,但SCC上升卻是由于夏季乳頭長(zhǎng)時(shí)間處于有大量病原微生物的環(huán)境中而造成感染和引起臨床癥狀的結(jié)果。
5 )其他因素
奶中SCC有一個(gè)正常的變化(如晝夜變化),正常擠奶時(shí)間所收集的奶與兩次擠奶間隔期間收集的奶SCC也有所不同,一般規(guī)律是,末期乳中SCC多,而擠奶前奶中SCC低,對(duì)同一乳區(qū)來(lái)說(shuō),它們相差多達(dá)4~7倍,而且擠奶后,高水平的SCC可持續(xù) 4 個(gè)小時(shí)左右后才開始下降。Brolund 報(bào)道飼料改變也影響SCC,他認(rèn)為個(gè)體間差別對(duì) SCC 影響有較大的作用,但后來(lái)研究表明,這與感染相比影響很小。
牛奶體細(xì)胞作為牛群乳腺的健康與否的一個(gè)指標(biāo),其優(yōu)勢(shì)是顯而易見的 ,以月為基準(zhǔn)測(cè)定牛群SCC可以很好地監(jiān)控奶汁的質(zhì)量和乳腺的健康程度。但值得強(qiáng)調(diào)的是,傳染性病原微生物感染后牛奶SCC數(shù)量變化比較明顯,而條件性病原微生物感染后,由于其感染恢復(fù)快,它們感染后,尤其是在管理良好的牛場(chǎng)即便是轉(zhuǎn)歸為臨床型乳房炎,它們SCC也能維持在300,000/mL以下,在這樣一種情況下,SCC 就不能直觀地反映出乳腺的健康狀況。也由于這些病原感染后,高水平的SCC維持時(shí)間短,而且它們感染率也很低,無(wú)論什么時(shí)候均小于10%乳區(qū),但以全年經(jīng)濟(jì)收入來(lái)說(shuō),由條件性病原微生物造成臨床型乳房炎引起損失還是比較大的。SCC主要影響因素是微生物感染,而其他一些因素只要不影響到乳腺的健康,它的影響就不是很大,而SCC的上升,是乳腺防御微生物入侵而采取的相應(yīng)措施,應(yīng)激等可使已感染到乳腺SCC上升,而對(duì)于未感染的乳區(qū)來(lái)說(shuō)除了晝夜變化對(duì) SCC 有影響外,其他因素影響都非常小。
(本特利儀器發(fā)文引自:上海市奶牛研究所)
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